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【题目】我国曾经发生过因“非典型性肺炎”而死亡的病例,经研究发现,该病是由SARS病毒(一种RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗,开展了前期研究工作,其简要的操作流程如图:

(1)实验步骤①所代表的反应过程是______________________

(2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制酶和________酶,后者的作用是将用限制性核酸内切酶切割的S蛋白基因和________________连接起来。

(3)如果省略步骤②而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其原因是S蛋白基因在大肠杆菌中不能________________,也不能________________

(4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性,可用_________________与SARS康复病人血清进行抗原—抗体特异性反应实验,从而得出结论。

(5)步骤④和⑥的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”),根本原因______________________

【答案】(1)逆转录 (2DNA连接 载体 S基因(3)复制 合成S基因的mRNA4)大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清(5)相同 表达蛋白质所用的基因相同

【解析】试题分析:据图可知,过程是以RNA为模板合成DNA的过程,即是逆转录。基因表达载体的构建需要使用限制酶和DNA连接酶;DNA连接酶的作用是将目的基因和运载体连接在一起。若把S基因直接导入大肠杆菌,S基因很难把自己整合到细菌的DNA上,这样的S基因是无法复制和转录的;要想检验大肠杆菌中表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同作用,必须要获得病毒S蛋白,根据免疫知识,SARS康复病人血清应该含有该物质。检测蛋白质的方法是抗原抗体杂交,即将大肠杆菌中表达的S蛋白与SARS康复病人血清(含有抗S蛋白的抗体)结合。由于基因相同,因此所表达的蛋白质中氨基酸序列也应相同。

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