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    根据所学内容回答下列问题：
    （1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割．为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，一般选用
     
    种限制酶分别对
     
    进行切割．
    （2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量
     
    ，补充合成培养基中缺乏的物质．细胞培养应在含CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是
     
    ．
    （3）为了防止动物细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的
     
    ．
    考点：基因工程的原理及技术,动物细胞与组织培养过程
    专题：
    分析：1、限制酶具有特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．形成黏性末端和平末端两种．      
    2、DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
    3、动物细胞培养的条件：
    （1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．
    （2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．
    （3）温度和PH．
    （4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的PH）．
    解答： 解：（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割．为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，一般选用两种限制酶分别对目的基因、运载体进行切割．
    （2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，补充合成培养基中缺乏的物质．细胞培养应在含CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液pH．
    （3）为了防止动物细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素．
    故答案为：
    （1）两       目的基因、质粒（运载体）
    （2）血清       维持培养液pH
    （3）抗生素
    点评：本题知识点简单，考查基因工程和动物细胞培养的相关知识，要求考生识记基因工程的工具及作用；识记动物细胞培养的过程及条件，能结合所学的知识准确答题．
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    下列物质中，构成植物细胞膜结构的重要的物质是（　　）
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    欲鉴别一株高茎豌豆是否是纯合子，最简便易行的方法是（　　）
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    科学家将人的生长激素基因与质粒重组后，导致牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了人生长激素，操作流程如图所示，请据图回答（已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ识别序列和切点是-GATC-）．

    （1）基因工程中，获得目的基因的主要方法有从
     
    获得和
     
    扩增．
    （2）据图分析，在构建重组质粒的过程中，质粒用
     
    进行切割，再用
     
    催化末端的连接．
    （3）获能的精子和卵细胞相遇后首先发生
     
    反应，之后精子接触卵细胞膜，并进一步与卵结合，在该过程中，
     
    和
     
    可以防止其它精子入卵．
    （4）将牛受精卵进行人工培养后，一般可选择
     
    期的、发育良好的胚胎进行移植．

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    一对表现正常的夫妻生有一个患某遗传病的女儿和一个正常的儿子，若这个儿子与一父亲患此病的正常女人结婚，他们生出一患病儿子的机率（　　）
    A、
    1
    2
    B、
    1
    4
    C、
    1
    16
    D、
    1
    12

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    采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊．但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中．以下有关叙述，正确的是（　　）
    A、可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵
    B、人体细胞中凝血因子基因的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍
    C、在该转基因羊中，人凝血因子基因存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中
    D、人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA

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    根据基因工程的有关知识，回答下列问题：
    （1）限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有
     
    和
     
    ．
    （2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是
     
    ．
    （3）反转录作用的模板是
     
    ，产物是
     
    ．若要在体外获得大量反转录产物，常采用
     
    技术．
    （4）基因工程中除质粒外，
     
    和
     
    也可作为运载体．

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    判断一株高茎豌豆是否是纯合体，最简便的方法是（　　）
    A、测交B、自交
    C、与纯合高茎杂交D、与纯合矮茎杂交

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