[题目]2018年1月25日.中科院神经科学研究所团队利用类似克隆羊多莉的体细胞克隆技术克隆的猕猴“中中和“华华 .登上了全球顶尖学术期刊的封面.该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代.下图是体细胞克隆猴的技术流程图.请据图回答下列问题:(1)图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养.其原因是 .� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】2018年1月25日，中科院神经科学研究所团队利用类似克隆羊多莉的体细胞克隆技术克隆的猕猴“中中”和“华华”，登上了全球顶尖学术期刊《细胞》的封面，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。下图是体细胞克隆猴的技术流程图，请据图回答下列问题：

（1）图中选择猕猴胚胎期而非成年期的成纤维细胞进行培养，其原因是______，刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后首先会出现______现象。每一次传代培养时，常常利用______（填写仪器名）对酶消化得到的细胞悬浮液进行浓度测定，然后稀释到适宜浓度后接种到新的培养瓶中。

（2）图中步骤①是克隆猴技术难点之一，需要将卵母细胞培养到______后进行去核操作，步骤①中使用了特殊的显微镜对卵母细胞内的纺锤体以及透明带结构进行非侵入性观察和分析，去核事实上是去除卵母细胞的纺锤体和______结构，这种去核方法的优点是______。

（3）体细胞克隆猴的另外一个难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差，科学家发现胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中KDM4d mRNA翻译产生的酶的作用是______。

（4）以体细胞克隆猴作为实验动物模型显著优势之一是同一批克隆猴群的遗传背景相同，图中克隆猴的遗传物质来自于______。

【答案】胚胎成纤维细胞增殖能力更强，更易于培养（细胞）贴壁生长血球计数板（或分光光度计）减数第二次分裂中期（MⅡ中期）染色体去核率高；对卵母细胞的损伤小；不影响卵母细胞以及未来胚胎的发育潜能催化组蛋白的去甲基化成纤维细胞的细胞核和卵母细胞的细胞质

【解析】

图示为体细胞克隆猴的技术流程图，利用去核卵母细胞和胚胎成纤维细胞的核组成重组细胞，经过激活，注入KDM4d mRNA，移植到代孕母后体内，最终获得体细胞克隆的猕猴。

（1）选择猕猴胚胎期成纤维细胞进行培养，是因为胚胎成纤维细胞增殖能力更强，更易于培养，刚放入培养瓶中的细胞沉降到瓶底部后会出现贴壁生长现象。传代培养时，对酶消化得到的细胞悬浮液进行浓度测定可利用血球计数板（或分光光度计）。

（2）图中获取的卵母细胞培养到减Ⅱ中期后进行去核操作，步骤①中使用了特殊的显微镜对卵母细胞内的纺锤体以及透明带结构进行非侵入性观察和分析，去核事实上是去除卵母细胞的纺锤体和染色体结构，这种去核方法的优点是去核率高；对卵母细胞的损伤小；不影响卵母细胞以及未来胚胎的发育潜能。

（3）胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关，因此图中KDM4d mRNA翻译产生的酶的作用很可能是催化组蛋白的去甲基化。

（4）图中克隆猴的遗传物质来自于两部分，即成纤维细胞的细胞核和卵母细胞的细胞质。

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