Question

抗生素作为治疗细菌感染的药物，其高效性和巨大的经济价值使抗生素工业经久不衰。其中青霉素的发现和应用具有划时代的意义。

（1）下面是发现和研究青霉素的过程：

问题：在培养细菌的培养基中，发现青霉菌，在其周围没有细菌生长。没有青霉菌的培养基内布满了细菌。 假设： 实验：把青霉菌放入培养液内培养，一段时间后除去青霉菌，并用这种培养液培养细菌，观察细菌的生长情况。 结果：这种培养液阻止了细菌的生长和繁殖。 结论：青霉菌可产生一种阻止细菌生长繁殖的物质。

①该实验的假设是                                               。

②以上实验还不足以论证以上结论，请在以上实验的基础上，补充相应的实验方法。

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（2）为了研究细菌对青霉素抗药性形成的机理，有人设计了如下实验方案：

步骤1：取培养皿A若干(A₁、A₂、A₃……)，加入普通细菌培养基；取培养皿B若干(B₁、B₂、B₃……)，加入含青霉素的细菌培养基。

步骤2：用涂布器将适量细菌培养液均匀地涂布在培养皿A₁的培养基表面，置于适宜的条件下培养一段时间，培养基的表面会出现一些细菌菌落。

步骤3：用灭菌后的丝绒包上棉花制成的一枚“印章”，在A₁上轻轻盖一下，再在B₁上轻轻盖一下，这样A₁中的细胞就按一定的位置准确地“复制”到了B₁之中。将B₁培养一段时间后，B₁中一定部位出现了少量菌落。

步骤4：根据B₁中菌落出现的方位，将A₁中对应位置的菌落取出，均匀涂抹在A₂表面，培养一段时间后，培养基表面又会出现许多菌落。

反复重复步骤3、4，在B₂、B₃……中保留下来的菌落越来越多。直到最后，所有“复制”到B中的菌落全都保留下来，都具有对青霉素的抗药性。

①培养基的营养构成中一般都含有       　、　　     、  　　和无机盐。此外，培           养基还需要满足微  生物生长对       、　　       营养物质以及           的要求。

②微生物接种的方法很多，由“步骤2”可知，此实验采用的是              法。此方法可通过统计菌落数推测出样品中大约含有多少活菌，但统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为                                                        。

③如果B₁中没有菌落保留下来，实验就无法进行下去。若要使实验进行下去，可以采用的方法有                                                               。

Answer 1

（1）①青霉菌可能阻止细菌的生长和繁殖

②增加对照实验。具体方法为：将另一组相同的细菌放在未培养过青霉菌的、其他成分完成相同的培养液中，在完全相同的环境中进行培养，观察其生长繁殖情况

（2）①碳源  氮源   水     pH    特殊   氧气 

②涂布平板     当两个或多个细胞连在一起时，观察到的只是一个菌落

③用适量紫外线照射一段时间(其它引起基因突变的方法也行)