[题目]图1表示含有目的基因D的DNA片段及其中部分碱基序列.图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MpsⅠ.BamHⅠ.MboⅠ.SmaⅠ4种限制性核酸内切酶．它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG.G↓GATCC.↓GATC.CCC↓GGG．现要培育含目的基因D的大肠杆菌.请回答下列问题: (1)为了提高试验成功率.需要通过PCR扩增目的基因.以获得目的基因的大量� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

精英家教网 > 高中生物 > 题目详情

【题目】图1表示含有目的基因D的DNA片段及其中部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MpsⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶．它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．现要培育含目的基因D的大肠杆菌，请回答下列问题：
（1）为了提高试验成功率，需要通过PCR扩增目的基因，以获得目的基因的大量拷贝，该过程除需目的基因和dNTP （包括dATP、dGTP，dCTP、dTTP）之外还需提供和．
（2）图2中，启动子的作用是．
（3）分别用4种限制酶切割图1中的DNA片段，能形成黏性末端的是．
（4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是．为了提高重组质粒导入大肠杆菌的成功率，需将大肠杆菌用进行处理．
（5）为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌图3所示的培养基上培养，得到如图3的菌落．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到图4所示的培养基上培养，得到如图4的结果（空圈表示与图3对照无菌落的位置）．请推测：图3和图4培养基里含的抗生素分别是，．图4中生长的大肠杆菌中是否有目的基因D？．

【答案】
（1）热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）；引物
（2）与RNA聚合酶结合，驱动基因转录出mRNA
（3）MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ
（4）BamHⅠ；Ca2+
（5）抗生素B；抗生素A；不含
【解析】解：（1）利用PCR技术扩增目的基因需要以目的基因为模板，以四种脱氧核苷酸作为原料，同时还需要热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）和引物．（2）启动子的作用是与RNA聚合酶结合，驱动基因转录出mRNA．（3）根据题干中提供的限制酶识别序列和切割位点可知，目的基因上均存在四种限制酶的识别序列，但是SmaⅠ限制酶切割得到的是平末端，其它三种酶切割得到的是黏性末端．（4）由图1可知，目的基因两侧是GGATCC序列，该序列是限制酶BamHⅠ的识别序列，因此要将质粒和目的基因D连接形成重组质粒，应选用限制酶BamHⅠ切割．为了提高重组质粒导入大肠杆菌的成功率，需将大肠杆菌用Ca2+进行处理，使大肠杆菌变为感受态细胞．（5）用限制酶BamHⅠ切割质粒后，用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，因此首先用含有抗生素B的培养基培养大肠杆菌，能生存下来的是含有普通质粒和重组质粒的大肠杆菌；再用含有抗生素A的培养基培养，能生存下来的是含有普通质粒的大肠杆菌，即图4中生长的大肠杆菌不含目的基因D．所以答案是：（1）热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）；引物；（2）与RNA聚合酶结合，驱动基因转录出mRNA；（3）MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ；（4）BamHⅠ；Ca2+；（5）抗生素B；抗生素A；不含
【考点精析】本题主要考查了基因工程的原理及技术的相关知识点，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重组技术才能正确解答此题．

练习册系列答案

年级	高中课程	年级	初中课程
高一	高一免费课程推荐！	初一	初一免费课程推荐！
高二	高二免费课程推荐！	初二	初二免费课程推荐！
高三	高三免费课程推荐！	初三	初三免费课程推荐！
更多初中、高中辅导课程推荐,点击进入>>

相关习题

科目：高中生物 来源： 题型：

【题目】DNA分子双螺旋结构模型提出之后，人们又去探究DNA是如何传递遗传信息的。当时推测可能有如图A所示的三种方式。1958年，Meslson和Stahl用密度梯度离心的方法，追踪由15N标记的DNA亲本链的去向，实验过程是：在氮源为14N的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA分子均为14N-DNA（对照），在氮源为15N的培养基上生长的大肠杆菌，其DNA均为15N-DNA（亲代），将亲代大肠杆菌转移到含14N的培养基上，再连续繁殖两代（子代Ⅰ和子代Ⅱ）后离心得到如图B所示的结果。请依据上述材料回答问题：

（1）如果与对照相比，子代Ⅰ离心后能分辨出轻和重两条密度带，则说明DNA复制的方式是。如果子代Ⅰ离心后只有1条中等密度带，则可以排除DNA复制的方式是。

如果子代Ⅰ离心后只有1条中等密度带，再继续做子代Ⅱ的DNA密度鉴定：

①若子代Ⅱ离心后可以分出中、轻两条密度带，则可以确定DNA复制的方式是。

②若子代Ⅱ离心后不能分出中、轻两条密度带，则可以确定DNA复制的方式是。

（2）他们观测的实验数据如下：梯度离心DNA浮力密度（g/ml）表

分析实验数据可知：实验结果与当初推测的DNA三种可能复制方式中的方式相吻合。

（3）无论是有丝分裂还是减数分裂，都需要有遗传物质的复制，都遵循半保留复制原则。请依据此原则回答以下问题：

①用15N标记了一个精原细胞的一对同源染色体的DNA分子双链，然后放在不含15N标记的培养基中，经过正常的减数分裂产生的四个精子中，含有15N的精子有个。

②用32P标记了玉米体细胞（含20条染色体）的DNA分子双链，再将这些细胞转入不含32P的培养基中培养，在第二次细胞分裂完成后，每个细胞中被32P标记的染色体条数是。

查看答案和解析>>

科目：高中生物 来源： 题型：

【题目】下列关于植物生长素的叙述，正确的是

A. 缺乏氧气会影响植物体内生长素的极性运输

B. 植物向光生长能够说明生长素作用的两重性

C. 细胞的成熟程度不会影响生长素作用的发挥

D. 生长素合成的前体物是色氨酸，化学本质是蛋白质

查看答案和解析>>

科目：高中生物 来源： 题型：

【题目】人的X染色体和Y染色体大小、形态不完全相同，但存在着同源区（II）和非同源区（I、III）（如下图）。由此可以推测（）

A. II片段上有控制男性性别决定的基因

B. II片段上某基因控制的遗传病，男性患病率不等于女性

C. III片段上某基因控制的遗传病，患者全为男性

D. I片段上某隐性基因控制的遗传病，女性患病率高于男性

查看答案和解析>>

科目：高中生物 来源： 题型：

【题目】两个杂合子交配，后代只有一种表现型，这两个杂合子是（）

A. AABb×aaBb B. aaBb×Aabb

C. AABb×AaBB D. AaBb×AaBb

查看答案和解析>>

科目：高中生物 来源： 题型：

【题目】

A. 蛋白质具有多样性，是由于氨基酸的种类、数目、排列顺序及氨基酸的空间结构不同

B. 乳酸菌、酵母菌都具有合成蛋白质的结构

C. 人体内的激素都是蛋白质

D. 蛋白酶不能与双缩脲试剂反应生成紫色

查看答案和解析>>

科目：高中生物 来源： 题型：

【题目】一切生命活动都离不开蛋白质，如图所示部分细胞结构和多种蛋白质，请回答下列有关问题：

（1）A蛋白参与细胞间的相互粘连，所以在动物细胞工程中常用处理组织碎块，使细胞分散开．
（2）B蛋白与物质跨膜运输有关，如果转运过程需ATP供能，则转运方式称为，若转运过程不消耗ATP，则转运方式称为，能量来自于所转运物质形成的势能．
（3）C蛋白只能与特定的分子结合，结合后使蛋白质的发生变化，像“分子开关”一样，引起细胞内一系列变化，是细胞膜功能的分子基础．
（4）D蛋白和细胞骨架共同完成细胞内的物质运输，细胞骨架其化学本质是．
（5）E蛋白是具有催化功能的酶，因其只能，所以E蛋白的功能具有专一性的特点．
（6）F蛋白的功能是与DNA分子的某一部位结合，以DNA分子的一条链为模板合成RNA分子，F蛋白的名称是．