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    10．回答下列关于微生物的问题．
    陈皮是一味传统的中草药，研究者从陈皮中分离出有益微生物，制成微生物制剂再应用于陈皮的生产，有助于陈皮的防腐与风味的维持．具体操作如图，其中①～④表示过程．

    （1）如上图中过程③所用的接种方法是稀释涂布法，过程④的目的是分离纯化，所用的接种方法是平板划线法．整个操作过程均为无菌操作，所使用的器皿均灭过菌，其目的是杀死微生物及芽孢．
    研究者从陈皮中共分离纯化得到23 株菌株，分别标为cp01-cp23，但没有分离纯化得到真菌．提取该23株菌株DNA，经过PCR技术扩增后电泳（DNA在一定的电场力作用下，在凝胶中向正极泳动，DNA分子越大，泳动越慢），所得电泳图谱如图，其中M表示已知不同分子量的DNA，比照其大小可以粗略估算样品DNA分子量的大小．

    （2）据题意分析，图中的电泳方向是由上至下（由上至下/由下至上），图中用圆圈标出的DNA其分子量大小范围在500～750bp之间．
    （3）已知同一类群的菌株电泳后DNA图谱一致，据图分析，该23株菌株共分4个类群．其中，与cp12属于同一类群的有cp18、cp19、cp23．
    （4）陈皮样品中没有分离到真菌，可能的原因是ABCD（多选）
    A．陈皮的处理对真菌有抑制作用B．该陈皮样品中可能没有真菌
    C．陈皮能够抑制多种真菌的生长D．陈皮中的细菌对真菌有抑制作用
    E．陈皮样品无法为真菌提供碳源．

    分析 从陈皮中筛选分离目的微生物的一般步骤是：样品取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．据图分析：图中3是稀释涂布平板法接种，4是平板划线法接种．

    解答 解：（1）据图分析，过程③培养达到的菌落均匀，所用的接种方法是稀释涂布平板法，过程④是平板划线法，目的是分离纯化．无菌操作过程中的灭菌目的是杀死微生物细胞、孢子及芽孢．
    （2）依据题意和题图，电泳方向是由上至下．图中用圆圈标出的DNA其分子量大小范围对应在500～750bp之间．
    （3）由于同一类群的菌株电泳后DNA图谱一致，据图分析，该23株菌株共分4个类群．cp12、cp18、cp19、cp23的DNA的分子量大致相同，应该属于同一类群．
    （4）陈皮样品中没有分离到真菌，可能的原因有陈皮的处理对真菌有抑制作用、该陈皮样品中可能没有真菌、陈皮能够抑制多种真菌的生长或陈皮中的细菌对真菌有抑制作用．故选：ABCD．
    故答案为：
    （1）稀释涂布法    分离纯化       平板划线法    杀死微生物及芽孢
    （2）由上至下       500～750 
    （3）4     cp18、cp19、cp23
    （4）ABCD

    点评 本题结合图示主要考查微生物的筛选与分离及电泳等知识，意在强化学生对相关知识的理解与运用，题目难度中等．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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