【题目】下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料,请分析回答下列问题:
资料1:巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌,能将甲醇作为其唯一碳源,此时AOX1基因受到诱导而表达【5′AOX1和3′AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子】.
资料2:巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体,其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中以实现表达.
资料3:限制酶切位点
(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上、限制酶识别序列,这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化.
(2)酶切获取HBsAg基因后,需用将其连接到pPIC9K质粒上,形成重组质粒,并将其导入大肠杆菌以获取 .
(3)步骤3中应选用限制酶来切割重组质粒获得重组DNA,然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞.
(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功,在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选,转化后的细胞中是否含有HBsAg基因,可以用方法进行检测.
(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后,需要向其中加入以维持其生活,同时诱导HBsAg基因表达.
(6)与大肠杆菌等细菌相比,用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞,其优点是在蛋白质合成后,细胞可以对其进行并分泌到细胞外,便于提取.
【答案】
(1)SnaBⅠ;AvrⅡ
(2)DNA连接酶;大量重组质粒
(3)BglⅡ
(4)DNA分子杂交
(5)甲醇
(6)加工(修饰)
【解析】解:(1)重组质粒上的目的基因若要表达,需要目的基因的首尾含有启动子和终止子.而SnaBⅠ、AvrⅡ识别的序列在启动子与终止子之间,只要在目的基因两侧A和B位置分别接上这两种序列,并用SnaBⅠ、AvrⅡ这两种内切酶对质粒和目的基因同时切割,便会各自出现相同的粘性末端,便于重组与表达,同时防止自身环化,因此在HBsAg基因两侧的A和B位置接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的识别序列.(2)①用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒;②导入大肠杆菌体内,目的是利用大肠杆菌无性繁殖速度,短时间内可获取大量的重组质粒. (3)重组DNA的两侧分别是启动子和终止子,除BglⅡ外,其它限制酶会破坏含有启动子、终止子的目的基因. (4)用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因. (5)资料1显示,甲醇为该酵母菌的唯一碳源,同时诱导HBsAg基因表达. (6)酵母菌为真核生物,细胞内具有对分泌蛋白加工的内质网和高尔基体等细胞器,细菌等原核生物,不具有内质网和高尔基体等细胞器. 故答案为:(1)SnaBⅠAvrⅡ(2)DNA连接酶 大量重组质粒(3)BglⅡ(4)DNA分子杂交(5)甲醇(6)加工(修饰)
分析题图:图中质粒含有SnaB、AvrⅡ、BglⅡ和SacI限制酶切割位点,其中SacI位于启动子上,BglⅡ位于终止子上.要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,只能用限制酶SnaB和AvrⅡ切割质粒,要获取含有5′AOX1﹣﹣3′AOX1段基因,应选用限制酶BglⅡ来切割.5′AOX1﹣﹣3′AOX1段基因含有卡那霉素抗性基因,在培养基中加入卡那霉素以便筛选导入重组质粒的目的菌.
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【题目】向日葵种子粒大(B)对粒小(b)是显性,含油少(S)对含油多(s)是显性,某人用粒大油少和粒大油多的向日葵进行杂交,结果如图所示.这些杂交后代的基因型和表现型的种类分别是( )
A.9种 4种
B.8种 6种
C.6种 4种
D.4种 6种
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科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】为研究环境因素对光合作用强度的影响,利用甲图所示的实验装置,控制不同光照强度进行实验,统计相同时间内叶圆片上浮的数量,实验结果如乙所示。请回答:
(1)实验前需要向烧杯中的清水吹气,其原因是_____________。
(2)光照一段时间后,叶圆片上浮的原因是_____________。
(3)乙图的横坐标是_____________。根据实验结果可得出的结论是_____________。
(4)利用甲图所示的实验装置,还可以研究其他环境因素对光合作用强度的影响,请拟定一个新课题的名称:__________________________。
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【题目】人体血红蛋白中的一条肽链有145个肽键,则形成这条肽链的氨基酸分子数及它们相互缩合过程中生成的水分子数分别是
A. 145个和144个 B. 146个和145个
C. 145个和145个 D. 145个和146个
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【题目】下列为细胞分裂的几种模式图及其每条染色体的DNA含量在分裂过程中的变化.则下列叙述正确的是( )
A.甲图为有丝分裂后期,每条染色体的DNA含量对应丁图的BC段
B.乙图是有丝分裂中期,乙图与丙图细胞不是同一种生物
C.丙图可能是雌配子,每条染色体的DNA含量对应丁图的BC段
D.乙图中含有4个染色单体
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【题目】色氨酸在植物体内经过一系列反应可转变成吲哚乙酸.某研究小组研究了Zn对玉米幼苗中色氨酸和吲哚乙酸含量的影响,实验结果如图所示,下列有关分析错误的是( )
A.据实验结果可推测Zn能促进色氨酸和吲哚乙酸合成
B.培养幼苗的培养液中应该定时通入空气
C.实验组在加Zn的前后也形成了对照
D.色氨酸转变成吲哚乙酸的过程发生在核糖体
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【题目】下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料,请分析回答下列问题:
资料1:巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌,能将甲醇作为其唯一碳源,此时AOX1基因受到诱导而表达【5′AOX1和3′AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子】.
资料2:巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体,其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中以实现表达.
资料3:限制酶切位点
(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上、限制酶识别序列,这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化.
(2)酶切获取HBsAg基因后,需用将其连接到pPIC9K质粒上,形成重组质粒,并将其导入大肠杆菌以获取 .
(3)步骤3中应选用限制酶来切割重组质粒获得重组DNA,然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞.
(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功,在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选,转化后的细胞中是否含有HBsAg基因,可以用方法进行检测.
(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后,需要向其中加入以维持其生活,同时诱导HBsAg基因表达.
(6)与大肠杆菌等细菌相比,用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞,其优点是在蛋白质合成后,细胞可以对其进行并分泌到细胞外,便于提取.
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【题目】质膜的流动镶嵌模型及物质跨膜运输示意图如图所示,其中离子通道是一种通道蛋白,①、②、③、④代表物质运输方式.下列相关叙述正确的是( )
A.细胞吸水膨胀时,质膜的厚度就会变小,说明质膜具有选择透性
B.质膜上载体蛋白结合葡萄糖后其空间结构会发生改变
C.乙酰胆碱受体是一种通道蛋白,乙酰胆碱通过②方式进人突触后膜
D.神经元接受刺激产生兴奋的生理基础是Na+通过④方式内流
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科目:高中生物 来源: 题型:
【题目】下列与实验相关的叙述,错误的是
A. 光学显微镜可用于观察植物细胞的质壁分离现象
B. 观察细胞质流动实验中为了使效果更明显,可以适当提高黑藻的环境温度
C. 制备细胞膜时不能用鸟类红细胞代替哺乳动物成熟红细胞
D. 健那绿能将活细胞中的线粒体染成灰绿色
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