Question

【题目】如图是纯化纤维素分解菌并生产乙醇的基本工作流程，请回答下列问题:

（1）图中①过程选取富含纤维素的土壤，在鉴定和筛选所需微生物时需用____________对纤维素进行染色并制成选择培养基。最后还要在平板培养基上分离纯化目的菌。为避免杂菌污染培养物和环境，接种时要在________旁操作。

（2）图中②环节获得的酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，分別为C1酶、CX酶和________。前两种酶使纤维素分解成________，第三种酶将其进一步分解成葡萄糖。⑤环节常用的菌种是________。

（3）用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中纤维素分解菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，取0.2ml稀释液涂布，得到以下统计结果；涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和246；请计算每毫升原液中的菌体数是________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量________。

Answer 1

【答案】刚果红酒精灯火焰旁葡萄糖苷酶纤维二糖酵母菌1.16×109 少

【解析】

题图中表示利用纤维素分解菌提取纤维素酶，并利用这种酶分解纤维素以得到葡萄糖，最后利用葡萄糖进行酒精发酵的过程。在鉴定和筛选这种细菌时，选择富含纤维素的土壤较易获得目的菌种，同时需要用到选择培养基，如刚果红能和纤维素结合形成红色复合物，目的菌种能在含刚果红的选择培养基中形成透明圈，从而达到筛选目的。分析题图：①表示纤维素分解菌的筛选，②表示纤维素酶的活性鉴定，③表示纤维素发酵，④表示接种酵母菌，⑤表示无氧发酵产生乙醇。

（1）分析图解可知，图中①过程表示纤维素分解菌的筛选，因此选取产酶微生物时应选择富含纤维素的土壤，在鉴定和筛选这种微生物时需用刚果红对纤维素进行染色并制成选择培养基。最后还要在平板培养基上分离纯化目的菌。为避免杂菌污染培养物和环境，接种时要在酒精灯火焰旁旁操作。

（2）从目的菌种中得到的纤维素酶一般认为至少包括三种组分别为C酶、C酶和葡萄糖苷酶。前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。⑤过程表示无氧发酵产生乙醇的过程，此过程需要用酵母菌作为菌种。

（3））涂布的三个平板的菌落的平均值为（210+240+246）/3=232个。每毫升原液中的菌体数是232/0.2×106=1.16×109个，由于两个或多个细菌连在一起时，看到的是一个菌落，因此用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量少。