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    18．回答有关基因工程的问题．
    （1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生平末端．若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生相同（填“相同”或“不同”）黏性末端的限制酶．
    （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的位点，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质．在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为DNA分子杂交技术．为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成人胰岛素，常用抗原-抗体杂交技术．
    （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体的DNA上．
    （4）人的基因在细菌体内能表达，说明人和细菌共用一套密码子．

    分析 1、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
    2、启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度．终止子是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列．
    3、目的基因分子水平上的检测：
    ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；
    ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；
    ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．

    解答 解：（1）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种．若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生相同黏性末端的限制酶，以便于两者进行重组．
    （2）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质．在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，使大肠杆菌变成感受态细胞，以利于表达载体进入．为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为DNA分子杂交技术．为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成人胰岛素，常用抗原-抗体杂交技术．
    （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体的DNA上．
    （4）人的基因在细菌体内能表达，说明人和细菌共用一套密码子．
    故答案为：
    （1）平　相同
    （2）RNA聚合酶识别和结合的位点，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质　　Ca2+
    DNA分子杂交技术　　　人胰岛素　　抗原-抗体杂交
    （3）T-DNA　染色体的DNA
    （4）共用一套密码子

    点评 本题考查了基因工程的相关知识，要求考生能够识记限制酶的作用特点和作用结果；识记启动子的功能；识记目的基因分子水平上检测的方法；识记农杆菌转化法的相关过程等，难度适中，属于考纲中识记、理解层次的考查．

    练习册系列答案
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    A．心房肽和抗利尿激素在水平衡调节上作用相反
    B．该物质合成和分泌与核糖体、线粒体、内质网、高尔基体等细胞器有关
    C．该物质应有利于钠保留在体内
    D．该物质的分泌说明心脏具有内分泌器官的作用

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    B．复制时严格遵循碱基互补配对原则
    C．一边解旋一边合成，同时进行
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    （1）若已获取PG的mRNA，可通过逆转录法获取PG基因．
    （2）构建基因表达载体时，用限制酶切割DNA后可能产生黏性末端，也可能产生平末端，后者需用T4DNA连接酶（E．coli DNA连接酶、T4DNA连接酶）将双链DNA片段“缝合”起来．“缝合”的过程，就是恢复被限制酶切开的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键的过程．
    （3）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有卡那霉素的培养基进行筛选．
    （4）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用植物组织培养技术；其中，愈伤组织经再分化形成完整植株．
    （5）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，通过观察细胞是否发生质壁分离现象来鉴别细胞壁是否再生．

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    A．始终存在同源染色体
    B．始终存在姐妹染色单体
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    D．染色体的行为变化主要是同源染色体彼此分离

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    A．病毒的遗传物质一定是RNAB．病毒的遗传物质一定是DNA
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