Question

【题目】陈皮是一味传统的中草药，研究者从陈皮中分离出有益微生物，制成微生物制剂再应用于陈皮的生产，有助于陈皮的防腐与风味的维持．具体操作如图，其中①～④表示过程．

研究者从陈皮中共分离纯化得到23株菌株，分别标为cp01﹣cp23，但没有分离纯化得到真菌．提取该23株菌株DNA，经过PCR技术扩增后电泳（DNA在一定的电场力作用下，在凝胶中向正极泳动，DNA分子越大，泳动越慢），所得电泳图谱如图，其中M表示已知不同分子量的DNA，比照其大小可以粗略估算样品DNA分子量的大小．

（1）如上图中过程③所用的接种方法是 ， 过程④的目的是 ， 所用的接种方法是 ． 整个操作过程均为无菌操作，所使用的器皿均灭过菌，其目的是 ．
（2）据题意分析，图中的电泳方向是（由上至下/由下至上），图中用圆圈标出的DNA其分子量大小范围在bp之间．
（3）已知同一类群的菌株电泳后DNA图谱一致，据图分析，该23株菌株共分个类群．其中，与cp12属于同一类群的有 ．
（4）陈皮样品中没有分离到真菌，可能的原因是（ ）（多选）
A.陈皮的处理对真菌有抑制作用
B.该陈皮样品中可能没有真菌
C.陈皮能够抑制多种真菌的生长
D.陈皮中的细菌对真菌有抑制作用
E.陈皮样品无法为真菌提供碳源

Answer 1

【答案】
（1）稀释涂布法；分离纯化；平板划线法；杀死微生物及芽孢
（2）由上至下；500～750
（3）4；cp18，cp19，cp23
（4）ABCD
【解析】解：（1）据图分析，过程③培养达到的菌落均匀，所用的接种方法是稀释涂布平板法，过程④是平板划线法，目的是分离纯化．无菌操作过程中的灭菌目的是杀死微生物细胞、孢子及芽孢．（2）依据题意和题图，电泳方向是由上至下．图中用圆圈标出的DNA其分子量大小范围对应在500～750bp之间．（3）由于同一类群的菌株电泳后DNA图谱一致，据图分析，该23株菌株共分4个类群．cp12、cp18、cp19、cp23的DNA的分子量大致相同，应该属于同一类群．（4）陈皮样品中没有分离到真菌，可能的原因有陈皮的处理对真菌有抑制作用、该陈皮样品中可能没有真菌、陈皮能够抑制多种真菌的生长或陈皮中的细菌对真菌有抑制作用．故选：ABCD．
所以答案是：（1）稀释涂布法 分离纯化 平板划线法 杀死微生物及芽孢（2）由上至下 500～750（3）4 cp18，cp19，cp23（4）ABCD