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    14．单克隆抗体在医疗、诊断等方面发挥着越来越重要的作用．英国科学家米尔斯坦和科勒设计了一个用被免疫的B淋巴细胞制备单克隆抗体的实验，如下图表示其实验流程，请回答下列问题：
    （1）a是骨髓瘤细胞，b是杂种细胞（杂交细胞、杂交瘤细胞）；①过程是细胞融合，②表示在选择性培养基上进行培养；③过程包括了体外培养和小鼠腹腔内培养．
    （2）制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体．
    （3）如何判断经过②后的细胞就是杂交细胞？经过②过程后只有杂交细胞才能存活．
    （4）③过程如在体外培养，则需要的环境条件是（要求答5项）无菌、无毒、营养充足、温度适宜、pH适宜、充足氧气、5%的CO2．
    （5）诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇（PEG），植物体细胞杂交之前还需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，植物体细胞杂交技术在一定程度上解决了杂交育种的远缘杂交不亲和（障碍）问题．

    分析 1、单克隆抗体制备流程
    （1）对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；（2）得到相应的B淋巴细胞；（3）将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；（4）在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）（5）对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；（6）最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体．
    2、分析题图：a细胞是小鼠骨髓瘤细胞；b表示诱导细胞融合杂交瘤细胞；c表示筛选出的杂交瘤细胞；①过程是细胞融合，②表示在选择性培养基上进行培养，③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养．

    解答 解：（1）根据试题分析a是骨髓瘤细胞，b是杂种细胞（杂交细胞、杂交瘤细胞）；①过程是细胞融合；②表示在选择性培养基上进行培养；③是对杂交瘤细胞进行克隆化培养，该过程包括了体外培养和小鼠腹腔内培养．
    （2）制备单克隆抗体时，选择B淋巴细胞的原因是每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体，这样核骨髓瘤细胞形成的杂交瘤细胞具有双亲细胞的遗传物质，既能大量增殖又能分泌特异性抗体．
    （3）②过程使用特定的选择性培养基筛选，经过②过程后只有杂交细胞才能存活．
    （4）动物细胞在体外培养需要无菌、无毒、营养充足、温度适宜、pH适宜、充足氧气、5%的CO2等条件．
    （5）诱导动、植物细胞融合常用的一种化学诱导剂是聚乙二醇（PEG），植物体细胞杂交之前还需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，植物体细胞杂交技术能突破生殖隔离，在一定程度上解决了杂交育种的远缘杂交不亲和（障碍）问题．
    故答案为：
    （1）骨髓瘤细胞  杂种细胞（杂交细胞、杂交瘤细胞）  细胞融合  选择性培养基  小鼠腹腔内培养
    （2）每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体
    （3）经过②过程后只有杂交细胞才能存活
    （4）无菌、无毒、营养充足、温度适宜、pH适宜、充足氧气、5%的CO2
    （5）聚乙二醇（PEG）  纤维素酶和果胶酶   远缘杂交不亲和（障碍）

    点评 本题综合考查动物细胞工程中常用的技术手段动物细胞培养和单克隆抗体的制备．动物细胞培养是动物细胞工程中其他技术手段的基础，在动物细胞培养过程中通过在培养液中加入一定量的抗生素，定期更换培养液创造无菌、无毒的环境，在培养液中通入二氧化碳以维持培养液的pH；在单克隆抗体的制备过程中，需要对小鼠注射抗原以产生相应的淋巴细胞，然后筛选出能够产生特定抗体的杂交瘤细胞，最后培养获得单克隆抗体．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源：2016届江苏省高三上第一次学期检测生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下图为真核细胞内某基因进行信息传递的部分结构示意图，已知该基因全部碱基中A占20%，下列说法正确的是

    A．该基因一定存在于细胞核内染色体DNA上

    B．该基因的一条核苷酸链中（C+G）/（A+T）为3:2

    C．该基因正在进行复制过程，遵循基因互补配对原则

    D．限制性内切酶可作用于①部位，DNA解旋酶可作用于②部位

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    5．下列关于生物类别的叙述正确的是（　　）
    A．颤藻和衣藻都是原核生物B．酵母菌和草履虫都是真核生物
    C．肺炎双球菌和霉菌都是细菌D．衣原体和噬菌体都属于病毒

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    2．如图是无子西瓜的培育流程简图，依据图解和所学生物学知识，判断下列说法错误的是（　　）
    A．秋水仙素的作用是抑制有丝分裂前期纺锤体的形成，不影响着丝点的分裂
    B．四倍体植株所结的西瓜，果皮细胞内含有4个染色体组
    C．三倍体母本虽然授以二倍体父本的花粉，却无法形成正常的卵子与精子结合
    D．无子辣椒、无子番茄的繁育过程与无子西瓜类似

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    9．降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等．某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：

    获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点）和BamHⅠ（识别序列和切割位点）双酶切后插入大肠杆菌质粒中．下列有关分析错误的是（　　）
    A．Klenow酶是一种DNA聚合酶
    B．鉴定和选择重组质粒，需要大肠杆菌质粒中含有标记基因
    C．EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是将目的基因连接进入载体，并且用不同的酶可以固定连接方向
    D．合成的双链DNA有72个碱基对

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    19．最新研究表明，地球历史上最悲剧的物种大灭绝事件可能是由细菌导致的．该物种大灭绝事件发生于2.52亿年前二叠纪末期（在恐龙出现之前），无数物种由于无法及时适应当时气候变化，而逐渐消失灭绝．与此同时，某种细菌A得到快速大量繁殖，原因有二：
    第一，该细菌A能利用海洋沉积层的二氧化碳和氢气合成并释放甲烷，显著改变气候和海洋化学成分；
    第二，火山喷发导致镍元素迅速增多，这种至关重要的营养物质帮助微生物（细菌A）增殖．
    （1）从生态系统成分的角度看，该细菌A属于生产者．
    （2）在进行微生物培养时必须防止外来其他杂菌的干扰．为此，在接种前，除了必须对培养皿、接种用具和培养基进行严格灭菌外，还必须对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外；在接种操作时，必须在超净台上进行操作（在酒精灯火焰旁操作）、接种环放在火焰上灼烧并冷却、试管口火焰灼烧灭菌．
    （3）鉴于细菌A在高浓度有机废水的生物处理中能发挥很大作用，要对其进行筛选，则应选用表中的C培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
     培养液NaNO3  牛肉膏K2HPO4  MgSO4•7H2OKClNiSO4 
     A-- 1g/L1g/L  0.5 g/L0.01g/L 
     B 3g/L3g/L  1g/L1g/L  0.5 g/L 0.01g/L 
     C 3g/L- 1g/L 1g/L0.5 g/L 0.01g/L 
    ①A培养液缺少氮源，细菌不能很好生长，②B培养液所含营养物质比较齐全，不能筛选出细菌A．
    （4）分离并观察细菌A，可采用平板划线法或涂布平板操作法将初筛菌液接种在配方适宜的固体培养基上．接种前，必须对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌．
    （5）细菌A计数，可吸取菌液1ml稀释1000倍，然后吸取稀释后的菌液0.2ml，接种于培养基上培养，接种所使用的工具是无菌涂布器．一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如图，则该菌液的浓度是40000个细菌/ml．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    6．红豆杉，又名紫杉，可从其树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇．如图是某同学设计的有关紫杉醇抗肿瘤实验的研究流程，请分析并回答：

    （1）酶X是胰蛋白（胶原蛋白）酶，其主要作用是使肿瘤细胞分散开．
    （2）物质Y是生理盐水，乙组起对照作用．
    （3）细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入血清、血浆．
    （4）为清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是（定期）更换培养液．
    （5）实验结果：若甲组肿瘤细胞的数目少于乙组，说明紫杉醇有抗肿瘤作用．
    （6）为了解决紫杉醇的药源问题，理论上可用植物组织培养技术把离体的红豆杉细胞经过脱分化培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行工厂化生产．

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    科目：高中生物 来源：2016届山东省莱州市高三上第一次质量检测生物试卷（解析版） 题型：选择题

    森林中，阳光可能会穿过森林中的空隙，在地上投下“光斑”，它们随着太阳的运动和枝叶的摆动而移动。下图显示了在“光斑”照耀前后一株生长旺盛的植物光合作用过程中吸收CO2和释放O2的情况。下列有关说法正确的是：

    A．“光斑”开始，氧气释放速率增加，表明此时植物开始光合作用并且强度大于呼吸作用

    B．图中的A点两条曲线重合，表明植物此时光合作用等于呼吸作用

    C．该实验表明，制约氧气释放速率的因素是光照强度和CO2

    D．A至B段，两条曲线出现差异，此时CO2吸收速率大于氧气的释放速率，表明植物呼吸作用大于光合作用

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    1．如图中 A、B、C是正在进行分裂的某种雌性动物细胞示意图，请据图回答下列问题：

    （1）通过细胞分裂产生体细胞的是图A．此图染色体与DNA分子数目的比是1：2．
    （2）细胞内含有同源染色体的是图AB．
    （3）B图细胞分裂后产生的细胞名称为次级卵母细胞和极体．
    （4）C图表示细胞正在进行减数分裂，时期为减数第二次分裂前期．
    （5）在A、B、C三张图各自的后面一个时期中，它们细胞内存在的着丝粒数目的比例为4、4、2．

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