[题目]薄荷可产生蚜虫报警信息素EβF.用于驱散蚜虫并吸引蚜虫的天敌.通过基因工程可制备含EβF合成酶基因的转基因抗蚜麦.请回答问题:(1)若利用PCR技术获取EβF合成酶基因.在PCR反应体系中需加入 .模板序列.原料及种引物.至少完成轮循环.才能获得只含目的基因的DNA片段.如果提取到薄荷细胞中EβF合成酶的mRNA.则可用方法获取目� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】薄荷可产生蚜虫报警信息素EβF，用于驱散蚜虫并吸引蚜虫的天敌。通过基因工程可制备含EβF合成酶基因的转基因抗蚜麦。请回答问题：

（1）若利用PCR技术获取EβF合成酶基因，在PCR反应体系中需加入________、模板序列、原料及____种引物，至少完成__________轮循环，才能获得只含目的基因的DNA片段。如果提取到薄荷细胞中EβF合成酶的mRNA，则可用___________方法获取目的基因。

（2）研究者利用4种限制酶切割目的基因和质粒，各限制酶的识别序列和切割位点如下图所示。酶切后的产物连接时，目的基因上SalⅠ切割产生的末端应与质粒上_________切割产生的末端相连接。连接完成后，该连接点___________((填“能”“不能”)被这两种限制酶中的某一种切割。

（3）欲从个体水平上检测转基因抗蚜麦是否培育成功，在小麦叶片上接种蚜虫后，通过观察叶片上蚜虫的_________或__________作为判定的依据。

（4）下列属于转基因抗蚜麦推广种植后引发的安全性问题的有_________。（多选）

A.小麦不再感染蚜虫

B.目的基因向其他生物扩散

C.减少杀虫剂对环境的破坏

D.改变现有生态结构

【答案】耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）两3逆（反）转录法XhoⅠ不能停留时间天敌数量蚜虫数量B、D

【解析】

分析题图：限制酶NstⅠ切割形成的黏性末端与限制酶PstⅠ切割形成的黏性末端相同，而限制酶SalⅠ与限制酶XhoⅠ切割形成的黏性末端相同。紧扣题干信息“薄荷可产生蚜虫报警信息素EβF用于驱散蚜虫并吸引蚜虫的天敌”答题。转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）。

（1）利用PCR技术获取EβF合成酶基因，需要在PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）、模板序列、原料及2种引物。结合下图可知，至少完成3轮循环，才能获得只含目的基因的DNA片段。如果提取到薄荷细胞中EβF合成酶的mRNA，则可用逆转录法获取目的基因。

（2）根据图中四种限制酶的识别序列和切割位点可知，限制酶NstⅠ切割形成的黏性末端与限制酶PstⅠ切割形成的黏性末端相同，而限制酶SalⅠ与限制酶XhoⅠ切割形成的黏性末端相同，因此将酶切后的产物连接时，与SalⅠ切割产生的末端应与质粒上XhoⅠ切割产生的末端相连接，与NstⅠ切割产生的末端应与质粒上PstⅠ切割产生的末端相连接。由于四种限制酶的识别序列各不相同，所以完成连接后，该连接点不能被这四种限制酶中的某一种切割。

（3）欲从个体水平上检测转基因抗蚜麦是否培育成功，在小麦叶片上接种蚜虫后，通过观察叶片上蚜虫的数量、蚜虫在叶片上停留的时间、叶片上蚜虫天敌的数量可作为转基因抗蚜麦筛选指标。

（4）小麦是否会被蚜虫感染，与食物安全、生物安全和环境安全无直接关系，A错误；转基因植物上的目的基因向其他生物扩散，导致基因污染，B正确；薄荷可产生蚜虫报警信息素EβF用于驱散蚜虫并吸引蚜虫的天敌，这样可以减少杀虫剂对环境的破坏，这是转基因植物的优点，C错误；转基因植物竞争能力强，可能成为“入侵的外来物种”，进而改变现有生态结构，D正确。

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（3）由于伤口过深，而破伤风芽孢杆菌又是 _________（需氧、厌氧、兼性厌氧）型微生物，医生担心盗墓人会得“破伤风”，所以为他注射了破伤风抗毒素血清进行紧急预防或治疗，同时向他介绍了破伤风疫苗引发的免疫过程，如下图所示。