Question

【题目】【生物——选修1:生物技术实践】

“口嚼酒”因日本著名动画电影导演新海诚的新作《你的名字》而引起人们的关注。世界上有些地方很就有口嚼酒的记载。请回答下列相关问题：

（1）口嚼酒的做法是:首先需要将米煮熟，然后放入口中咀嚼—段时间，直至米粒变为糊状，再将其吐入特制容器中，令其发酵，经过几天便成为甜酸味的酒。上述的制作过程中，“咀嚼”可能具有两个作用，分别是__________和__________。参与口嚼酒形成初期的微生物主要是来自空气中的__________，末期形成酸味，可能是因为密封不严,产生了__________等物质。

（2）口嚼酒是一种自酿酒，不仅品质不高，而且卫生条件难以把握，会有杂菌滋生的危险。某生物兴趣小组想探究口嚼酒制作过程中会滋生哪些微生物，进行了进一步的实验，实验步骤如下：

①制作口嚼酒。

②制作培养基：计算→称量→溶化→__________→倒平板。

③接种：每天同一时间将口嚼酒液体摇匀后按照图1和图2的方法进行操作，该方法是________。并在每天接种的培养皿上注明培养日期，最后将所有培养基放在相同且适宜的环境下培养。

④经过一段适宜时间后，观察不同培养基上的菌落数和菌落的形态，并进行品种鉴定。图3是三个不同时间获得的培养基，其时间先后为________（填字母）。

上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，目的是________________________。

（3）兴趣小组成员在实验后期看到培养基上长满了许多杂菌菌落，若他们采用图4的方法对杂菌中的母的菌进行纯化，则在________（填数字）区最可能获得纯净的母的菌。

Answer 1

【答案】 增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵 使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖 酵母菌 醋酸 灭菌（或高压蒸汽灭菌） 稀释涂布平板法 B、C、A 检验培养基灭菌是否彻底（答案合理即可给分) 5

【解析】试题分析：无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞．计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。

（1）将熟的米饭放入嘴里“咀嚼”，一方面增大酶与米饭的接触面积，有利于发酵，另一方面使唾液淀粉酶将米饭中的淀粉分解成麦芽糖。口嚼酒形成初期，酵母菌通过无氧呼吸产生酒精，末期密封不严,醋酸菌进行有氧呼吸产生了醋酸。

（2）微生物培养基的配制过程：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。图1和图2显示的接种方法是稀释涂布平板法，该方法获得的菌种随着时间的推移，会越来越多，所以图3中的先后顺序为B、C、A。上述实验在时间上形成前后对照，但是还需要设置一个空白对照，以检验培养基灭菌是否彻底。

（3）图4为平板划线法，该方法随着划线次数的增加，细菌的数量越来越少，最后为单一菌了，所以5区最可能获得纯净的母的菌。