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    【题目】科研人员利用基因工程技术构建蜂鸟的基因组文库，研究β-球蛋白基因的功能，流程如图1所示。

    （1）首先需要用同种__________处理蜂鸟的DNA和质粒，并用DNA连接酶处理，得到__________，再与经__________处理得到的感受态大肠杆菌混合。将混合物接种到添加__________的培养基上培养，一段时间后，选择颜色为__________（填“白色”或“蓝色”）的菌落进一步培养，获得导入蜂鸟DNA片段的大肠杆菌。用上述方法可以获得导入蜂鸟不同基因的大肠杆菌，构建出蜂鸟的__________。

    （2）科研人员可从获得的大肠杆菌中提取__________，利用图2中的__________引物组合进行PCR，以进一步研究蜂鸟β-球蛋白基因的功能。

    （3）导入大肠杆菌的蜂鸟β-球蛋白基因并未表达正常功能的蛋白质，可能的原因是__________。（写出一项即可）

    【答案】限制性核酸内切酶 重组质粒 Ca2+ 氨苄青霉素和X 白色 基因文库 DNA B和D 大肠杆菌无法正常完成蜂鸟基因表达的肽链的加工

    【解析】

    质粒中有氨苄青霉素抗性基因和L基因，前者让受体细胞具有抗氨苄青霉素的能力，后者基因表达产物能使物质X呈现蓝色。在构建基因表达载体时，据图可知，氨苄亲霉素抗性基因完好，而L基因被破坏，因此使用添加了氨苄青霉素和物质X的培养基培养经经感染大肠杆菌时，应选择白色的菌落克隆培养，就能获得导入了重组质粒的大肠杆菌。

    （1）将蜂鸟的β-球蛋白基因导入大肠杆菌前，需先构建基因表达载体，即先用同种限制酶处理蜂鸟的DNA和质粒，并用DNA连接酶酶进一步处理以得到重组质粒；将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即用Ca2+处理微生物细胞，使其处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态；由于重组质粒中含有氨苄青霉素抗性基因，且L基因被破坏，因此应使用添加了氨苄青霉素和物质X的培养基培养经上述处理的大肠杆菌，一段时间后，选择白色的菌落克隆培养。用上述方法可以获得导入蜂鸟各种基因的诸多大肠杆菌的克隆，形成蜂鸟的基因文库。

    （2）科研人员可从获得的大肠杆菌中提取DNA，用图2中的B和D两种引物完成PCR扩增（子链延伸的方向是5′→3′），以进一步研究蜂鸟β-球蛋白基因的功能。

    （3）导入大肠杆菌的蜂鸟β-球蛋白基因并未表达正常功能的蛋白质，可能的原因是：大肠杆菌是原核生物，无法正常完成蜂鸟基因表达的肽链的加工过程。

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    B. 乙组沉淀物含有放射性的可能原因是保温时间过长

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    A. 图1中，甲所示结构存在于线粒体，乙所示结构存在于叶绿体

    B. 5～8 h间，容器内的CO2含量将减少，番茄植株干重将增加

    C. 图1中，10 h时不再产生ATP的是甲膜；若此环境因素维持不变，容器内的O2含量将逐渐下降并完全耗尽，此时细胞质基质成为ATP合成的唯一场所

    D. 若在8h时，将容器置于冰水浴中，推测乙膜消耗O2的速率将（明显）下降，因为低温抑制了酶的活性

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    ②甲图所示细胞中，由于基因突变导致着丝点分裂形成的2个子染色体携带遗传信息不同

    ③乙图所示细胞可能处于减数第一次分裂后期，此阶段发生同源染色体的分离

    ④乙图所示细胞中某一极的染色体数目可能为2N

    ⑤丙图结果可来自于植物的雄蕊和雌蕊以及动物精巢等部位细胞

    ⑥如果丙图表示精巢内的几种细胞，则C组细胞可发生联会并产生四分体

    A. ②③⑤ B. ①④⑥ C. ②③⑤⑥ D. ②③④⑤⑥

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    B. 若A是肺泡细胞，呼吸急促时，b处氧气的含童高于a处

    C. 若A是肝脏细胞，饥饿时，b处葡萄糖的含量高于a处

    D. 若A是骨骼肌细胞，剧烈运动时，b处乳酸的含量高于a处

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    A. 甲图中A到B时间内植物细胞逐渐发生质壁分离，C点时细胞液浓度等于外界溶液的浓度

    B. 乙图中b点之后细胞液浓度下降速度减慢的原因可能是细胞壁的限制

    C. 丙图中A到B时间内细胞液浓度大于外界溶液浓度

    D. 丁图可表示质壁分离自动复原的过程，C点后细胞开始从外界溶液吸收溶质

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    A. 该实验运用了同位素标记法，出现④的结果至少需要90分钟

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    C. 对得到DNA以半保留方式复制的结论起关键作用的是试管③结果

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