番茄营养丰富.是人们喜爱的一类果蔬．但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因(PG).控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶.该酶能破坏细胞壁.使番茄软化.不耐贮藏．为满足人们的生产生活需要.科学家们通过基因工程技术.给普通番茄细胞中导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因.培育出了抗软化.保鲜时间长的番茄新品种．操作流程如如图所示.请据� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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番茄营养丰富，是人们喜爱的一类果蔬．但普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因（PG），控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏．为满足人们的生产生活需要，科学家们通过基因工程技术，给普通番茄细胞中导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因（抗PG），培育出了抗软化、保鲜时间长的番茄新品种．操作流程如如图所示，请据图回答：

（1）过程①通常会用两种限制酶切割目的基因的原因是

．
（2）经过程②可获得三种土壤农杆菌，除依据质粒上的

筛选出的含重组DNA的土壤农杆菌外，还有

、

两种土壤农杆菌．
（3）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接阻碍了PG表达时的

过程，最终使番茄获得抗软化的性状．
（4）若mRNA1的碱基序列是AACCUUGC，则mRNA2的碱基序列是

．
（5）目的基因能否在番茄细胞内稳定存在的关键是

．
（6）如果利用上述方法培育出的蕃茄不具抗软化性状，经分子杂交技术检测，发现细胞内有抗PG存在，但检测不到mRNA2分子，可能原因是目的基因（抗PG）上游缺少

．
（7）上述所得抗软化蕃茄的后代会发生性状分离现象，获得能稳定遗传的抗软化蕃茄的方法是

．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析图解：图中①表示基因表达载体的构建；②表示重组质粒导入土壤农杆菌，然后土壤农杆菌侵染番茄细胞，将目的基因整合到番茄染色体DNA上；③表示通过植物组织培养技术获得转基因植株的过程．

解答： 解：（1）过程①表示基因表达载体的构建，此过程通常会用两种限制酶切割目的基因，以产生不同的黏性末端，这样可以防止目的基因自身环化，保证目的基因可以和质粒定向连接．
（2）经过程②可获得三种土壤农杆菌，除依据质粒上的标记基因筛选出的含重组DNA的土壤农杆菌外，还有不含质粒、含普通（非重组）质粒两种土壤农杆菌．
（3）mRNA是翻译过程中的直接模板，从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接阻碍了PG表达时的翻译过程，最终使番茄获得抗软化的性状．
（4）若mRNA1的碱基序列是AACCUUGC，根据碱基互补配对原则，mRNA2的碱基序列是UUGGAACG．
（5）目的基因能否在番茄细胞内稳定存在的关键是目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA上．
（6）根据题意可知，该基因已经导入受体细胞，而细胞检测不到mRNA2分子，说明该目的基因未发生转录，而启动转录的是目的基因上游的启动子，因此可能原因是目的基因（抗PG）上游缺少启动子．
（7）基因工程获得产物中只有一个目的基因，因此可以表示为Aa，而杂合子不能稳定遗传，因此要获得能稳定遗传的抗软化蕃茄的方法是连续多次自交．
故答案为：
（1）防止目的基因自身环化
（2）标记基因不含质粒含普通（非重组）质粒
（3）翻译
（4）UUGGAACG
（5）目的基因是否整合到受体细胞的染色体DNA上
（6）启动子
（7）连续多次自交

点评：本题考查了基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和综合运用所学知识的能力，难度适中．考生要能够图中机理明确该该改造的原理，即通过目的基因的转录产生相应的mRNA，而该mRNA能够与细胞中相应mRNA发生互补配对，进而抑制翻译过程；识记基因表达载体的组成和启动子的作用．

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A、

B、

C、

D、

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，虚线表示

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．
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．

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，打开装置B的夹子

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结果：

．
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结果：

．
（4）用纱布包住装置B的试管，部分遮光，同时打开装置A、B的夹子①、②，并关闭夹子③，观察小圆形叶片上浮的情况．
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．

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，

．

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