在培育转基因植物的研究中.卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因.只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．下图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答:(1)A过程需要的酶有．(2)在基因工程中.基因表达载体的构建非常关键.对表达载体的要求是必需具有启动子. . . 等条件．(3)质粒的化学本质是 .B过程� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．下图为获得抗虫棉的技术流程．请据图回答：

（1）A过程需要的酶有

．
（2）在基因工程中，基因表达载体的构建非常关键，对表达载体的要求是必需具有启动子、

、

等条件．
（3）质粒的化学本质是

，B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是

．
（4）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入

．
（5）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用

作为探针．
（6）抗虫基因能在棉花细胞内表达，其根本原因是

．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：根据题意和图示分析可知：首先采用基因工程技术将抗虫基因导入离体棉花叶片组织，其过程为：获取目的基因（抗虫基因）→构建基因表达载体→将目的基因导入农杆菌→用含有卡那霉素的选择培养基筛选含有重组质粒的土壤农杆菌→利用农杆菌转化法将目的基因导入离体棉花叶片组织细胞．
其次采用植物组织培养技术，将导入抗虫基因的细胞培养成转基因抗虫植株，其过程主要包括脱分化和再分化两个步骤．

解答： 解：（1）图中A为基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组质粒．
（2）基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子和标记基因．
（3）质粒的化学本质是小型环状DNA．B过程是培养并选择含有重组质粒的土壤农杆菌，其中“选择”体现了质粒作为运载体必须具备具有标记基因；“培养”体现了质粒作为运载体必须能在宿主细胞中复制并稳定保存．
（4）C过程为诱导选择，既要诱导出愈伤组织还要进行筛选，筛选出被含重组质粒的农杆菌侵染的叶片细胞，淘汰掉普通细胞，故应添加卡那霉素．
（5）如果要检测转基因是否成功，D过程最好采用放射性同位素标记的抗虫基因作为探针，利用DNA分子杂交原理进行检测．
（6）抗虫基因能在棉花细胞内表达，其根本原因是所有生物共用一套遗传密码．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶．
（2）终止子、目的基因、标记基因
（3）小型环状DNA 在宿主细胞内自我复制、含有标记基因．
（4）卡那霉素
（5）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因
（6）所有生物共用一套遗传密码

点评：本题结合转基因抗虫植株的培育过程图，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能准确判断图中各过程的名称；识记质粒作为运载体的条件；掌握目的基因检测与鉴定的方法等．

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下列关于基因工程的说法中，正确的是（　　）

A、基因工程的设计和施工都是在细胞水平上进行的

B、目前基因工程所有的目的基因都是从供体细胞中直接分离得到的

C、只要检测出受体细胞中含有目的基因，那么目的基因一定能成功进行表达

D、基因工程能使科学家打破物种界限，定向改造生物性状

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玉米的光合效率较水稻的高，这与玉米中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）有很大的关系．如何将玉米的这一种酶转移到水稻等植物上一直是植物生物学家的研究课题之一．但实践证明，常规杂交育种手段很难如愿以偿．最近，有人利用土壤农杆菌介导法，将完整的玉米PEPC基因导入到了水稻的基因组中，为快速改良水稻的光合作用效率，提高粮食作物产量开辟了新途径．
（1）玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交是因为

．
（2）获得PEPC基因后，将其导入土壤农杆菌的质粒中，获得重组质粒需要的工具是

，请在框中补充某DNA片段并画出切割形成黏性末端的过程示意图．