[题目][生物一选修1生物技术实践]下面是筛选抗链酶素大肠杆菌的实验步骤及相关图解. 实验步骤:①把大量对链酶素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面.进行培养.②待其长出密集的小菌落后.用影印法接种到不含链霉素的培养基2上.随即再影印到含有链霉素的培养基3上.进行培养.③在培养基3上出现了个别抗链霉素的菌落.将其挑选� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】【生物一选修1生物技术实践】下面是筛选抗链酶素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。

实验步骤：

①把大量对链酶素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。

②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基2上，随即再影印到含有链霉素的培养基3上，进行培养。

③在培养基3上出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出。

请回答：

（1）配制培养基时除了满足基本的营养条件外，还需满足微生物生长对特殊营养物质、_______、_________的要求。

（2）从功能上看，含有链霉素的培养基属于_________培养基。若在培养基中加入伊红和美蓝，则培养皿中长出的菌落颜色为_________。由图可知，1号培养基接种的方法为_________。

（3）对2和3进行比较，在2上找到与3上相应的菌落，挑取其中一个菌落接种到_________（含链霉素/不含链霉素）的培养基上，如果有较多的菌落出现，则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之_________（前/后）。

（4）3中的菌落比1、2中的菌落少很多，这说明了基因突变具有_________的特点。

【答案】 pH 氧气选择黑色稀释涂布平板法含链霉素前频率低/低频性

【解析】试题分析：影印法接种的具体过程是：将待测的浓缩菌悬液涂在合适的平板上，等其长好后作为母平板（每平板上的菌落控制在50～300个）；用一小块灭菌的丝绒固定在直径较平板略小的圆柱形木块上，构成印章（即接种工具）；然后把长有菌落的母平板倒置在丝绒的印章上，轻轻印一下；再把此印章在另一含有选择培养基的平板上轻轻印一下，经培养后，选择培养基平板上长出的菌落与母平板上的菌落位置对应，比较影印平板与母平板上菌落生长情况，即可从相应位置的母平板上选出待测的突变型菌落．影印法最初是为证明微生物的抗药性突变是自发的、与相应的环境因素无关而设计的实验，目前已广泛应用于营养缺陷型的筛选以及抗药性菌株筛选等研究工作中。

（1）配制基在提供几种主要营养物质的基础上，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

（2）链霉素是抗生素，对大肠杆菌具有选择作用。在伊红和美蓝培养基上，大肠杆菌菌落菌落颜色为黑色。由图可知，1号培养基接种的方法为稀释涂布平板法。

（3）培养基2和培养基3上相同的菌落，是具有抗链霉素性状的大肠杆菌，将其中一个菌落接种到含链霉素的培养基上，出现较多的菌落，则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之前。

(4)抗链霉素性状是大肠杆菌基因突变获得的性状，3号培养皿中的菌落比1号、2号中的菌落少很多，这说明了基因突变频率很低。

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