Question

【题目】酵母菌生长的最适宜温度在20～30℃之间，能在pH为3～7.5的范围内生长，在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖，大约每1.5～2小时增殖一代。某研究性学习小组据此探究酵母菌种群在不同的培养液浓度和温度条件下种群密度的动态变化，进行了如下实验，实验操作步骤如下：

第一步：配制无菌马铃薯葡萄糖培养液和活化酵母菌液。

第二步：利用相同多套装置，在适宜条件下培养。

第三步：用血球计数板计数装置中起始酵母菌数目，做好记录。

第四步：将各装置放在其他条件相同且适宜的条件下培养。

第五步：连续7天，每天随机抽时间取样计数，做好记录。

回答下列问题：

（1）改正实验操作步骤中的一处错误：_____。

（2）某同学第5天在使用血球计数板计数时做法如下：

①摇匀试管，取1mL培养液并稀释10倍（稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液）。

②先将_____放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用吸水纸吸干，制作好临时装片。

③显微镜下观察计数：在观察计数时只记_____（填“被”或“不被”）染成蓝色的酵母菌。

（3）若在显微镜下观察计数某一小方格时，活菌分布如下图所示，则记录的数目是_____个。若平均每个样方中的酵母菌数目就是该数目，所使用的血球计数板有16个中方格，每1中方格中有25个小方格，每1个大方格容积为0.1mm3（1mL=1 000mm3）．1 mL培养液中酵母菌细胞个数_____。

（4）在实验过程中，培养液的pH值变化为_____。

（5）实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是否正确__________。

（6）在该实验的基础上，根据你对影响酵母菌种群生长的因素的推测，进一步确定一个研究实验的课题。_________________________________________。

Answer 1

【答案】 第五步中应为每天同一时间取样 盖玻片 不被 8 3.2×108 逐渐变小 不正确 酵母菌的种群数量与营养物质（代谢废物，pH，容氧量等）的变化关系

【解析】试题分析：本题综合考查学生对探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验原理、操作流程、注意事项掌握情况对实验数据的处理能力。熟记并理解相关的基础知识，据此结合题意，对相关问题进行解答。

(1)为了避免无关变量的干扰，实验中无关变量应控制相同且适宜。该实验第五步中的每天取样时间为无关变量，因此要注意在每天同一时间取样。否则，会因取样时间不同而影响结果准确性。

(2) ②在对酵母菌数量进行抽样检测时，应从振荡摇匀的试管中取1mL培养液并适当稀释，然后将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用吸水纸吸干，制作好临时装片。③在显微镜下观察计数时，由于死的酵母菌细胞膜失去选择透过性，因此被染成蓝色，而活的酵母菌不会被染色，因此计数时只记不被染成蓝色的酵母菌。

(3)对某一小方格中的酵母菌计数时，应统计方格内和相邻两边及其顶角上的酵母菌，据此分析图示可知，记录的数目是8个。如所使用的血球计数板有16个中方格，每l中方格中有25个小方格，每1个小方格容积为0.1mm3（1mL=1000mm3）；已知每个小方格平均有8个酵母菌，则1mL培养液中酵母细胞个数＝8×1000×10×25×16÷0.1＝3.2×108个。

(4)在实验过程中，由于酵母菌呼吸产生二氧化碳，使得培养液的pH值会逐渐变小。

(5) 实验结束后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的做法是不正确的，因为血球计数板上的刻度较精细，用试管刷蘸洗涤剂擦洗会破坏血球计数板的刻度，而应将血球计数板进行浸泡和冲洗。

(6)本题研究培养液中酵母菌种群数量与时间的关系。依据影响种群数量的变化因素，可进一步确定的研究实验课题为：酵母菌的种群数量与营养物质（代谢废物、PH、容氧量等）的变化关系。