[题目]如图所示.质粒PBR322上含有青霉素抗性基因(XR)和四环素抗性基因(YR)．其中.XR内部含有限制酶KasI识别序列.YR内部含有限制酶FseI.HpaII.NaeI.NgoMIV识别序列.且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处.目的基因内部不存在这些识别序列．(1)质粒PBR322的本质是 .FseI.HpaII.NaeI.NgoMIV中限制酶� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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【题目】如图所示，质粒PBR322上含有青霉素抗性基因（XR）和四环素抗性基因（YR）．其中，XR内部含有限制酶KasI识别序列，YR内部含有限制酶FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV识别序列，且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在这些识别序列．

（1）质粒PBR322的本质是_____。FseI、HpaII、NaeI、NgoMIV中限制酶的作用特点是_____．

（2）NaeI酶切目的基因和质粒，加入DNA连接酶连接后，进行大肠杆菌受体细胞导入操作。之后，受体细胞的类型包含_____

A．抗青霉素、抗四环素 B．抗青霉素、不抗四环素

C．不抗青霉素、抗四环素 D．不抗青霉素、不抗四环素

（3）若用KasI和FseI联合酶切上述重组质粒，则可能产生的酶切片段数_____。

A.2 B．3 C．4 D．5

（4）动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是_____。

A．受精卵能使目的基因高效表达B．受精卵可发育成动物个体

C．受精卵基因组更易接受DNA的插入D．受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作

（5）若目的基因模板链中的TGA序列对应1个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是_____．通过筛选出的受体细胞内，目的基因能成功表达的原因是_____。

【答案】闭环双链DNA 识别DNA特定的序列并在特定位点切割 ABD A B UGA 生物界共用一套遗传密码子

【解析】

分析题图：质粒PBR322上含有青霉素抗性基因（XR）和四环素抗性基因（YR），其中XR内部含有限制酶KasⅠ识别序列，YR内部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ识别序列，五种酶的识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在这些识别序列。由于限制酶具有特异性，因此用KasⅠ和FseⅠ联合酶切重组质粒，KasⅠ在XR可以切开一个位点，FseⅠ在YR也可以切开一个位点，这样只能得到2段DNA片段。

（1）质粒的本质是双链环状DNA分子．由于限制酶具有特异性，只能识别DNA特定的序列并在特定位点切割。
（2）将图中切开的质粒与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，可能有以下三种情况：
①质粒自身环化或质粒与质粒结合，将它们导入受体细胞后，由于XR、YR基因都没有被破坏，因此表现为XR、YR，A正确；
②有的质粒与目的基因连接形成重组质粒，这种重组质粒导入受体细胞后，由于YR基因被破坏，只有XR抗性，表现为XR、YS，B正确；
③目的基因自身环化或目的基因与目的基因结合，将它们导入受体细胞后，由于没有抗性基因，因此表现为XS、YS，D正确。
故选：ABD。
（3）根据题意，XR内部含有限制酶KasⅠ识别序列，YR内部含有限制酶FseⅠ、HpaⅡ、NaeⅠ、NgoMⅣ识别序列，五种酶的识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在这些识别序列。因此用KasⅠ和FseⅠ联合酶切重组质粒，KasⅠ在XR可以切开一个位点，FseⅠ在YR也可以切开一个位点，这样只能得到2段DNA片段，故选A。
（4）因为受精卵的全能性高，可以发育成动物个体，因此，动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞。故选：B。
（5）根据碱基配对原则，TGA序列对应的密码子是ACU，密码子ACU对应的tRNA上的反密码子是UGA。所有的生物都共用一套密码子，所以目的基因能成功表达。

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有丝分裂中期细胞（％）	1.0	1.2	1.5	3.1	11.2	11.5	12.3
染色体形态	正常	正常	正常	正常	正常	不正常	不正常