Question

9．用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质．下列叙述不正确的是（　　）

• A． 处理目的基因和运载体的限制性内切酶通常相同
• B． DNA连接酶和DNA聚合酶、解旋酶是构建重组质粒的工具酶
• C． 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导人了重组质粒
• D． 可将抗生素抗性基因插入运载体并作为标记基因

Answer 1

分析 1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、基因工程的工具：
（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．

解答 解：A、构建基因表达载体时，常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒，以产生相同的黏性末端，A正确；
B、构建重组质粒必需的工具酶是限制酶和DNA连接酶，不需要DNA聚合酶和解旋酶，B错误；
C、用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了质粒或重组质粒，是利用了质粒上有标记基因（即抗生素抗性基因），C正确；
D、可将抗生素抗性基因插入运载体并作为标记基因，从而便于筛选和鉴定，D正确．
故选：B．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的工具，明确基因工程的工具酶是DNA连接酶和限制酶；掌握基因工程运载体必须具备的条件；识记基因工程的操作步骤，能结合所学的知识准确答题．