1、 (理综1卷)下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是

A.发酵时需要不断通入无菌空气，否则会积累乳酸

B.发酵时常采用的培养基为液体天然培养基

C.从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产

D.当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量

14、（宁夏）【生物——选修3现代生物科技专题】（15分）     

   右图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分

化的示意图。请回答：

（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至

_________期的内细胞团或胎儿的_____中分离得到

的一类细胞。

   （2）图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下，培养液中加入___因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。

（3)在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因___________的结果。

（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。

（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________，其原因是___________。

（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞NDA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。

   （7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用__________细胞与骨髓细胞融合，经多交筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。

13、（广东A卷）（10分）生物技术实践

（1）商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生                 ，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间       表示。

（2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图

Ⅰ中的主要成分为       ；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

（3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步：       。反应过程中打开模板DNA双链的方法是       。

12、 (理综1卷)（10分）

桃果实成熟后，如果软化快，耐贮运性就会差。下图表示常温下A、B两个品种桃果成熟后硬度等变化的实验结果。

据图回答：

（1）该实验结果显示桃果实成熟后硬度降低，其硬度降低与细胞壁中的               

降解有关，该物质的降解与                   的活性变化有关，也与细胞壁中的          

降解有关，该物质的降解与                   的活性变化有关。

（2）A、B品种中耐贮运的品种是            。

（3）依据该实验结果推测，桃果实采摘后减缓变软的保存办法应该是                       ，因为                                               。

（4）采摘后若要促使果实提前成熟，科选用的方法有                   和               。

（5）一般来说，果实成熟过程中还伴随着绿色变浅，其原因是                              。

11、请用所给的实验材料和用具，设计实验来验证哺乳动物的蔗糖酶和淀粉酶的催化作用具有专一性。要求完成实验设计、补充实验步骤、预测实验结果、得出结论，并回答问题。　　

实验材料与用具：适宜浓度的蔗糖酶、唾液淀粉酶、蔗糖、淀粉四种溶液，菲林试剂、试管、　37℃　恒温水浴锅，沸水浴锅。　　

（1）若“+”代表加入适量的溶液，“—”代表不加溶液，甲、乙等代表试管标号，请用这些符号完成下表实验设计，请在答题卡上作答。　　

（2）实验步骤：　　

①按照上表中的设计，取试管、加溶液。　　

②　　

③　　

④　　

（3）结果预测：____________________________。　　

（4）结论：__________________________________。　　

（5）在上述试验中，如果仅将　37℃　恒温水浴锅的温度调到　20℃　。而在其他条件不变的情况下重做上述实验，出现砖红色试管中的颜色会比　37℃　时的浅，其原因是_______________。

10、（山东）（8分）（生物一生物技术实践）

人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：

请回答：

（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行                     。

     接种前，要对人参根进行              。

（2）用于离体培养的根切块，叫做                 。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于             污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于            

     污染。

（3）用少量           酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。

（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶剂，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用          

     方法，操作时应采用                加热。

9、利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。　　

（1）实验步骤：　　

①配置________（固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为________。　　

②将_____________接入已灭菌的培养基平板上。　　

③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是___________________。　　

④菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现_______________现象的菌落即为初选菌落，经分离、纯化后即可达到实验目的。　　

（2）若已得到二株变异菌株I和II，其淀粉转化率较高，经测定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉酶蛋白含量高，经进一步研究发现，突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区，可推测出菌株I的突变发生在_________区，菌株II的突变发生在____________区。

8、（宁夏）.【生物——选修1生物技术实践】（15分）

   （1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

   （2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。

   （3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。

   （4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。

   （5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。

   （6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

7、（江苏）(6分)酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

(注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化)

(1)实验过程中，需要轻摇试管，其目的是▲   ，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。

(2)从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有  ▲   等多种酶。该实验中▲  是空白对照组，其设置意义是▲  。

(3)用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用  ▲ 洗涤。

(4)原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是  ▲ 。

三、综合题

（每空？ 分，共？ 分）

6、（江苏多选）下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有

  A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞

  B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质

C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA

D．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化

二、填空题

（每空？ 分，共？ 分）